Andresa Aparecida Berretta 1 , Marcelo Augusto Duarte Silveira 2 , José Manuel Cóndor Capcha 3 ,David De Jong 4 *1 Departamento de Investigación, Desarrollo e Innovación, Apis Flora Indl. Coml. Ltda, Ribeirão Preto,São Paulo, Brasil. andresa.berretta@apisflora.com.br2 Instituto D’Or de Investigación y Educación (IDOR), Hospital São Rafael, Salvador, Brasil.marceloadsilveira@gmail.com3 Instituto Interdisciplinario de Células Madre de la Facultad de Medicina Miller, Universidad de Miami, Miami,Florida, Estados Unidos. jmcondor@med.miami.edu4 Departamento de Genética, Facultad de Medicina de Ribeirão Preto, Universidad de São Paulo, RibeirãoPreto, São Paulo, Brasil. ddjong@fmrp

Resumen

El propóleo, un material resinoso producido por las abejas melíferas a partir de exudados vegetales, ha sido utilizada durante mucho tiempo en la medicina tradicional a base de hierbas y se consume ampliamente como ayuda para la salud y el sistema inmunológico aumentador de presión. La pandemia COVID-19 ha renovado el interés en los productos de propóleo en todo el mundo; afortunadamente, varios aspectos del mecanismo de infección del SARS-CoV-2 son objetivos potenciales para compuestos de propóleo. La entrada del SARS-CoV-2 en las células huésped se caracteriza por la proteína de pico viral interacción con la enzima convertidora de angiotensina celular 2 (ACE2) y la serina proteasa TMPRSS2. Este mecanismo implica la sobreexpresión de PAK1, que es una quinasa que media el coronavirus-inflamación pulmonar inducida, fibrosis y supresión del sistema inmunológico. Los componentes de propóleo tienen efectos inhibidores sobre las vías de señalización ACE2, TMPRSS2 y PAK1; además, antiviral. La actividad se ha probado in vitro e in vivo . En estudios preclínicos, el propóleo promovió inmunorregulación de citocinas proinflamatorias, incluida la reducción de IL-6, IL-1 beta y TNF-

Esta inmunorregulación involucra monocitos y macrófagos, así como Jak2 / STAT3, NF-kB,y las vías del inflamasoma, lo que reduce el riesgo de síndrome de tormenta de citocinas, una importante mortalidad factor en la enfermedad COVID-19 avanzada. El propóleo también se ha mostrado prometedor como ayuda en el tratamiento de varias de las comorbilidades que son particularmente peligrosas en pacientes con COVID-19, incluyendo enfermedades respiratorias, hipertensión, diabetes y cáncer. Productos de propóleo estandarizados ahora se encuentran disponibles con propiedades bioactivas consistentes. Dada la emergencia actual provocada por la pandemia COVID-19 y opciones terapéuticas limitadas, el propóleo se presenta muy prometedor y como opción terapéutica relevante, segura, fácil de administrar por vía oral, está disponible como un suplemento natural y alimento funcional

1. Introducción

La pandemia de COVID-19 es motivo de grave preocupación debido a su impacto en la salud humana y en la economía. Es mucho más mortal que la influenza y otros tipos de enfermedades que han tenido recientemente impacto mundial [1], lo que obliga a los países a tomar medidas inusuales, como limitar los viajes, cerrar escuelas, negocios y otros lugares donde muchas personas pueden entrar en contacto entre sí. Se han adoptado diversas estrategias de salud pública en un intento por reducir el impacto de la enfermedad, pero con una eficacia limitada, ya que el virus continúa propagándose, a menudo a través de pacientes asintomáticos [2]. Desafortunadamente, las pruebas para determinar si las personas son infecciosas o fueron infectados previamente no están ampliamente disponibles, son costosas y con frecuencia, no nos ofrecen a tiempo resultados precisos. Se han propuesto y probado varias alternativas terapéuticas; sin embargo, la mayoría requiere datos más sólidos en los ensayos clínicos antes de que puedan utilizarse de forma amplia y segura [3]. Las medidas de aislamiento y permanencia en casa no protegen eficazmente a los trabajadores esenciales, especialmente el personal sanitario, que se ha infectado y está muriendo a un ritmo alarmante [4]. Las necesidades económicas y de otro tipo limitan la eficacia y la duración de estas medidas de aislamiento mantenido, especialmente en países pobres y en comunidades pobres como barrios marginales y favelas [5, 6]. A medida que las poblaciones intentan gradualmente volver a la normalidad, se reduce el distanciamiento social y las personas en las “profesiones no esenciales” regresan al lugar de trabajo, corriendo un mayor riesgo de infección. En este escenario, cualquier opción que pueda ayudar a mejorar la progresión de la enfermedad y sus consecuencias, incluso marginalmente, sería útil. El mundo necesita alternativas seguras para ayudar a reducir el impacto de esta enfermedad mortal. Productos naturales, que históricamente se han utilizado ampliamente para ayudar a evitar y aliviar enfermedades [7-9], se encuentran entre las opciones que se están considerando como tratamiento adyuvante para el SARS-CoV-2infección [10], porque generalmente son económicos, están ampliamente disponibles y rara vez tienen efectos secundarios indeseables. Algunos han demostrado actividad antiviral [11-13]. Una ventaja importante de el uso de remedios naturales es que las personas que tienen otros problemas de salud o que tienen una gripe leve con sintomas relacionados, pero no tienen los medios o el valor para visitar un centro médico que ya está abarrotado, podría tomar medidas sencillas y económicas para ayudar a reducir el impacto de la infección por el SRAS.CoV-2. Considerando la gran cantidad de muertes y otros tipos de daños que el COVID-19 la pandemia está causando, existe una necesidad urgente de encontrar tratamientos que hayan sido aprobados como seguros, y potencialmente capaz de inhibir el nuevo coronavirus, reducir su infectividad y / o aliviar los síntomas de infección [14, 15]. En esta línea, el propóleo y sus componentes emergen como potenciales materiales candidatos que podrían ayudar a reducir las consecuencias fisiopatológicas del SARS-CoV-2 infección [10].

La infección por SARS-CoV-2, el virus que causa COVID-19, se caracteriza por unirse entre las proteínas de pico viral y la enzima convertidora de angiotensina 2 (ACE2) [16]. Activación de la proteína de pico está mediada por proteasas, como TMPRSS2, que desempeñan un papel importante en la infección viral [17]. Después de la entrada, seguida de endocitosis, la infección por coronavirus causa regulación al alza PAK1, una quinasa que media la inflamación pulmonar, la fibrosis pulmonar y otras muertes críticas. El aumento de los niveles de PAK1 también suprime la respuesta inmunitaria adaptativa, lo que facilita la replicación [10, 18]. La infección por SARS-CoV-2 se asocia con niveles elevados de quimiocinas y citocinas proinflamatorias activadas que conducen al desarrollo de neumonía atípica, con insuficiencia respiratoria rápida e insuficiencia pulmonar [19] inmunológico / inflamatorio. Se ha demostrado que los fenómenos (como el síndrome de liberación de citocinas) son importantes en el espectro de la infección por SARS-CoV-2. Estos mecanismos están asociados con la disfunción de órganos más la carga viral per se [20]. En esta línea, un estudio observacional retrospectivo encontró una mayor concentración sérica niveles de citocinas proinflamatorias como IL-6, IL-1 y TNF-α, en pacientes conCOVID-19, en comparación con personas con enfermedad leve [21].

Existe evidencia considerable de que el propóleo puede reducir y aliviar los síntomas de enfermedades inflamatorias al afectar a varios ciclos metabólicos [22-24]. Recientemente, varios estudios han demostrado que el extracto de propóleo y algunos de sus componentes actúan contra varios objetivos importantes en el contexto fisiopatológico de la enfermedad causada por el SARS-CoV-2, como la reducción expresión de TMPRSS2 y reducción del anclaje de ACE2, que de otro modo facilitaría la entrada del virus en la célula; esto se suma a la inmunomodulación de monocitos / macrófagos(reduciendo la producción y eliminando IL-1 beta e IL-6), reducción de los factores de transcripción NF-KB y JAK2 / STAT3 y bloqueo de PAK1, que determinan las actividades inflamatorias y fibrosis causada por COVID-19 [25-28].Varias comorbilidades se han asociado con síntomas graves de COVID19 y una mayor posibilidad de pacientes que requieran cuidados intensivos; estos incluyen hipertensión y diabetes. También, las tasas de mortalidad de los pacientes con COVID19 son mucho más altas en aquellos con enfermedades cardiovasculares, crónicas, enfermedad respiratoria y diabetes [29, 30]. Existe evidencia considerable de que estas condiciones podría aliviarse con el tratamiento con propóleos. Esto incluye la investigación en modelos animales de diabetes.[31, 32], hipertensión [33, 34] y enfermedades cardiovasculares [35, 36]. El propóleo tiene propiedades que son particularmente relevantes para la infección por SARS-CoV-2, como la fortificación del sistema inmunológico, reducción replicación viral y acción antiinflamatoria [22, 24, 28, 37, 38]

2. Propóleo y sus propiedades

El propóleo es un producto derivado de resinas y exudados vegetales. Las plantas se defienden de patógenos principalmente mediante la producción de fitoquímicos, muchos de los cuales se han extraído y utilizado en medicina [39]. Las sustancias de defensa de las plantas recolectadas por las abejas incluyen fenoles y terpenoides [40-42]. Los compuestos fitoquímicos que parecen prometedores para la inhibición del coronavirus en humanos incluyen quercetina, miricetina y ácido cafeico, todos componentes del propóleo [43]. Miel de abejas y muchas otras especies de abejas sociales reconocen estas propiedades antimicrobianas y recogen y procesan selectivamente estos productos vegetales para hacer propóleos, que utilizan para proteger la colonia [44]. La producción y el uso de propóleo por las abejas melíferas evolucionó hasta el punto de que estas abejas sociales tienen menos genes inmunes que las especies de insectos solitarios [45]. Abejas en colonias que producen más propóleos son más saludables y viven más tiempo [46], y el consumo de propóleo por las abejas aumenta su respuesta inmune al desafío bacteriano [47]

La composición del propóleo varía según las especies vegetales disponibles en cada región.[42, 48, 49]. Dado que esta variabilidad puede afectar a sus propiedades medicinales, los productos de propóleo estandarizados han sido desarrollados para ayudar a satisfacer la necesidad de un producto que no varíe en los principales componentes bioactivos y es seguro, con mínima interacción con fármacos y eficacia probada en ensayos clínicos [50-53]. En las últimas décadas, se ha demostrado que tiene propiedades antimicrobianas (incluyendo antivirales), antiinflamatorios, inmunomoduladores, antioxidantes y anticancerígenos [54].Históricamente, el propóleo se ha utilizado ampliamente para aliviar diversas enfermedades [7-9, 55]; también ha sido considerado, entre otras alternativas naturales, como tratamiento adyuvante para la infección por SARS-CoV-2[10], porque generalmente es económico, está ampliamente disponible y rara vez causa efectos secundarios indeseables.

Algunos tipos de propóleos que son muy valorados por sus propiedades medicinales, como el propóleo verde brasileño es producido principalmente por las abejas a partir de materiales que recolectan de plantas, en este caso Baccharis dracunculifolia [56]. Después de que el origen botánico del propóleo haya identificado, se pueden hacer extractos de la planta para desarrollar productos útiles, como un medicamento enjuague bucal [57]. Sin embargo, las propiedades medicinales de estos extractos de plantas suelen ser inferiores en comparación con el propóleo que las abejas producen a partir de estos materiales vegetales [58-60].

3. Por qué el propóleo puede ser una buena opción para tratar el COVID-19

Entre las alternativas de la medicina natural, el propóleo ha sido ampliamente estudiado y ya está ampliamente consumido en muchos países [38, 55, 61-63]. Por ejemplo, productos de propóleo, como aerosoles y extractos para la garganta, son producidos por cientos de empresas en Brasil y se venden como una ayuda en casi todas las farmacias del país, demostrando de manera práctica que se puede consumir de forma segura. Estos productos de propóleo, y la materia prima para su fabricación, son ampliamente exportados por empresas brasileñas, especialmente a países asiáticos, incluido Japón, el Corea del Sur y China [50, 64]. La importancia del propóleo en China, Japón, Rusia y Corea en medicina, se refleja en el número de patentes de productos que contienen propóleo registradas en 2013, incluyendo alrededor de 1200 por China y 300 – 400 cada uno para Japón, Rusia y Corea [42]. Desde el 2013, Se solicitaron alrededor de 1400 nuevas patentes relacionadas con el propóleo en la oficina de patentes de EE. UU. Es una ingrediente clave de la medicina tradicional china [65]. Los científicos japoneses han aislado y patentado varios componentes del propóleo brasileño para el tratamiento del cáncer [66], lo que demuestra su utilidad. De hecho, el propóleo tiene un amplio espectro de propiedades farmacológicas y es un complemento alimenticio que es comúnmente consumido por personas sanas y enfermas como precaución preventiva y para tratamiento [67-69]. También se utiliza en medicina veterinaria, por sus propiedades antibacterianas, antifúngicas, antivirales, actividades antiparasitarias, hepatoprotectoras e inmunomoduladoras [70]. A raíz del brote de coronavirus, Corea del Sur ha visto una bendición en el uso de alimentos funcionales. Según su Ministerio de Seguridad de Alimentos y Medicamentos, «alimentos funcionales saludables» son nutrientes que han demostrado ser beneficiosos para la salud [71]. En marzo de este año, en respuesta ante la pandemia de coronavirus, el ministerio flexibilizó las regulaciones para el propóleo, que se consideran alimentos funcionales y permitieron nuevas formulaciones orales [72]. Sin embargo, a pesar de la considerable evidencia que el propóleo puede reducir y aliviar los síntomas de la enfermedad, su aceptación como un promotor de la salud en medicina humana ha sido limitado en muchos países como los EE. UU. debido a una crítica relevante de que los productos de propóleo no están estandarizados y varían en sus componentes y actividad biológica. En parte, esto se debe a que el propóleo varía con las especies de plantas disponibles encada región, de la cual las abejas recolectan resinas para producirla [42, 48, 49]. Sin embargo los productos de propóleo han estado disponibles recientemente para ayudar a satisfacer la necesidad de un producto que novarían en los principales componentes bioactivos y la eficacia [50, 52]. Una de esas opciones, una estandarizada mezcla de extracto de propóleo brasileño [54], se ha probado su seguridad y eficacia en ensayos clínicos para el tratamiento de enfermedades renales y diabetes [51], estomatitis protésica [73] y pacientes quemados [74]. Por tanto, el propóleo como alimento nutracéutico o funcional debe considerarse como un recurso que podría ayudar a luchar contra la pandemia de COVID-19

4. Algunos compuestos de propóleo pueden interactuar potencialmente con el SARS-CoV-2 M PRO

La comunidad investigadora ha examinado el código genético del coronavirus y los mecanismos subyacentes a los daños causados ​​por el SARS-CoV-2, para ayudar a la búsqueda de drogas y/o objetivos potenciales para inactivar el virus y reducir el daño que causa. La principal proteasa del coronavirus SARS-CoV-2, M PRO (enzima cisteína similar a la 3-quimotripsina), es esencial para el procesamiento de poliproteínas por coronavirus y para su ciclo de vida, y por lo tanto la inhibición del sitio activo de esta enzima es un objetivo relevante para el descubrimiento de fármacos [75]. En esta línea, Hashem evaluó varios compuestos naturales con un enfoque in silico.(acoplamiento molecular) para tratar de encontrar opciones útiles para el tratamiento de la infección por SARS-CoV-2. Curiosamente, éster fenetílico del ácido cafeico (CAPE), galangina, crisina y ácido cafeico, sustancias que se encuentran en varios tipos diferentes de propóleos en todo el mundo, aparecieron como fármacos potenciales contra este virus objetivo (cuadro 1) [76]. Específicamente, se predijo que CAPE interactuaría con SARS-CoV-2 M PRO en un estudio similar [77]. Por lo tanto, aunque será necesario realizar ensayos in vitro para evaluar las potenciales efectos anti-SARS-CoV-2 del propóleo y / o sus constituyentes, estos resultados in silico son bien aceptados.

5. El propóleo puede interactuar con ACE y TMPRSS2, potencialmente bloqueando o reduciendo el SARS-Invasión de CoV-2 de la célula huésped

El SARS-CoV-2 se une fuertemente a la enzima convertidora de angiotensina 2 (ACE2), usando esta enzima como receptor para la invasión y replicación en la célula huésped [17, 78], causando daño y aumento de la transmisión interpersonal [26, 79]. En consecuencia, los inhibidores de la ECA se han considerado cómo fármacos alternativos útiles. Sin embargo, los posibles efectos nocivos sobre los usuarios de los inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina (ECA) y los bloqueadores de los receptores de angiotensina (ARA) han surgido como una preocupación para el tratamiento de pacientes con COVID-19. Un estudio observacional que involucró 8,910pacientes no confirmaron esta sospecha y, por lo tanto, estas clases de fármacos siguen siendo una importante herramienta contra posibles eventos cardiovasculares [80]. La inhibición de la enzima ACE2 es un objetivo importante para el tratamiento contra el SARS-CoV-2 infección [15, 81]. Güler y col. [26] preparó un extracto alcohólico de propóleo e identificó algunos ácidos hidroxicinámicos (ácido cafeico, ácido p-cumárico, ácido t-cinámico y CAPE), los flavanonesrutina y miricetina, y las flavonas hesperidina, crisina y pinocembrina. Usando evaluaciones moleculares de acoplamiento, encontraron que la rutina tenía la energía de unión más alta a ACE2, seguida demiricetina, éster fenetílico del ácido cafeico, hesperetina y pinocembrina. La rutina interactúa con el zinc de dos de los sitios activos de ACE2, una metaloproteasa que presenta el mismo dedo de zinc en ACE1

Además de la evidencia in silico , Osés et al. [82] evaluó varios tipos de propóleos para varias características, incluida la inhibición de la ECA. Encontraron una fuerte inhibición para la mayoría de los tipos de propóleos que estudiaron, con una inhibición de la ECA superior al 90%. Se encontraron los mejores resultados con los componentes propóleos catequina y ácido p-cumárico.ACE2 y TMPRSS2 (serina proteasa 2 transmembrana) en la superficie de las células huésped son utilizados por el SARS-CoV-2 a través de la interacción con glicoproteínas de pico para continuar con la invasión y replicación [15]. Vardhan y Sahoo [15] estudiaron varias moléculas que se encuentran comúnmente en hierbas medicinales que utilizan procedimientos de acoplamiento molecular con objetivos relevantes, como ARN-ARN polimerasa dependiente (RdRp), ACE2 y glicoproteínas de pico y comparó el resultado con las de la hidroxicloroquina [15]. La limonina fue el compuesto más activo; sin embargo, la quercetina y el kaempferol, también compuestos de propóleo, dieron altas puntuaciones de acoplamiento [15]. Kaempferolse estudió en modelos de cáncer de próstata, y la expresión de TMPRSS2 se redujo, mostrando un mecanismo de acción potencial para un efecto antitumoral [83]. Kaempferol podría ser un importante componente de propóleo para su uso contra COVID-19, ya que está involucrado en la inhibición de TMPRSS2[83], potencialmente interactuando con ACE2, RdRp y glicoproteína de pico (SGp) [15], además de su actividad antiviral [84] (Tabla 1)

6. El propóleo bloquea el PAK-1, evitando potencialmente la fibrosis pulmonar y restaurando la normalidad del sistema inmunológico.

Entre los posibles objetivos para controlar el daño del COVID-19, el principal «patógeno»la quinasa PAK1 es clave. Es un componente esencial en la malaria y las infecciones virales, pero también es involucrado en una amplia variedad de otras enfermedades y condiciones patológicas, incluido el cáncer, inflamación e inmunosupresión, cuando se activa de forma anormal. Consecuencias de PAK1 la activación incluye fibrosis pulmonar [10], que es un factor agravante en COVID-19. PAK1 es activado por RAC. Xu y col. [18] demostró que el ácido cafeico y su éster (CAPE), componentes de propóleos, puede inactivar RAC, inhibiendo consecuentemente PAK1. La inactivación de PAK1 directamente, o corriente arriba, potencialmente puede atenuar la patogénesis del coronavirus [10]. Células B y células Tson linfocitos que producen anticuerpos específicos contra virus y otros intrusos, y PAK1 contribuye a su supresión. Los inhibidores de PAK1 pueden ayudar a combatir el virus y restaurar una respuesta inmune normal [10].

Propóleo de Europa y Asia templada, generalmente elaborado por abejas a partir de resinas recolectadas de los álamos, tienen compuestos predominantemente flavonoides, mientras que el propóleo verde (de Baccharisdracunculifolia ), un propóleo que se encuentra exclusivamente en Brasil, tiene varios tipos de flavonoides y fenilpropanoides prenilados, como artepellina C, bacarina y drupanina. Estos y todos los demás tipos de propóleos pueden inactivar PAK1 [10]. La artepilina C inhibe selectivamente PAK1 [85] (Tabla 1). Algunos estudios han demostrado que el propóleo puede actuar como inmunoestimulante, con la capacidad de mejorar la respuesta inmune. Sus componentes aumentan los títulos de anticuerpos neutralizantes, activan fagocitosis y aumentan los niveles de IFN-γ y el número de linfocitos [86]. Un aumento de IFN en los niveles de γ también fueron detectados por Shimizu et al. [28], quien evaluó los mecanismos involucrados en los efectos de algunos tipos de propóleos en un modelo animal de herpes simple CAPE (éster fenetílico del ácido cafeico) es un potente inhibidor de la activación de NF-kB en células monocíticas. Ansorge y col. [37] demostró que el propóleo, CAPE, quercetina, hesperidina y algunos otros flavonoides de propóleo pueden inhibir la producción de citocinas de las células T de tipo Th1 y Th2, mientras aumenta el TGF-beta 1, una importante citocina antiinflamatoria. Además, CAPE puede atenuar el estrés oxidativo y la inflamación mediante la regulación a la baja de la señalización JAK2 / STAT3[87] además de tener un efecto inmunomodulador, en el que CAPE inhibe la fosforilación de IL-6y STAT3, que son importantes para el desarrollo de Th17 proinflamatorio [88]. Además del efecto antiinflamatorio de CAPE y kaempferol, Paulino et al. [89]evaluaron el efecto antiinflamatorio de la artepellina C en el edema de la pata de rata y en cultivos celulares, demostrando que la actividad estaba mediada al menos en parte por la prostaglandina E2 y la inhibición del NO, mediante modulación NF-kB. La artepilina C es un biomarcador importante del propóleo verde brasileño(fuente botánica Baccharis dracunculifolia ).

La modulación inmunológica es deseable ya que la infección por coronavirus desregula la respuesta del sistema inmunológico en las fases iniciales de la infección, lo que facilita la replicación viral. Sin embargo, en posteriores etapas de COVID-19, el cuerpo desarrolla una respuesta inflamatoria exagerada, que puede dañar los pulmones y otros órganos. El propóleo, a diferencia de los inmunosupresores típicos, puede evitar la inmunosupresión durante las fases iniciales de la enfermedad y, en etapas posteriores, reducir la respuesta inflamatoria exagerada del huésped, inhibiendo el exceso de señalización de IL-6, IL-2 y JAK [90].CAPE, un componente de propóleo, también se conoce como un agente inmunomodulador [91] y debe ser considerado como una alternativa para ayudar a reducir una respuesta inflamatoria exagerada. En un ratón modelo, el propóleo tuvo acción inmunomoduladora in vivo sobre la expresión del receptor tipo Toll y sobreproducción de citocinas proinflamatorias [92]. Existe amplia evidencia de interferencia del propóleo y / o sus componentes con virus replicación e infectividad, potencialmente disminuyendo la inflamación pulmonar debido a propiedades antiinflamatorias, al tiempo que promueve el fortalecimiento del sistema inmunológico. Estas son propiedades útiles que podrían ayudar a minimizar los síntomas y efectos nocivos de COVID-19

7. Propóleo como sustancia antiviral

El propóleo se ha probado contra varios organismos de enfermedades virales; los éxitos iniciales impulsaron la investigación para determinar los componentes más útiles, que pueden modificarse para producir productos farmacéuticos más activos y específicos [93]. Fueron controlados con propóleo los virus en animales, los modelos con sugerencia para el control en humanos incluyendo la influenza [11, 94], virus del herpes simplex2 [95] y VIH [93, 96]. Shimizu y col. [28] evaluó tres tipos diferentes de propóleo en extractos de etanol, utilizando un modelo murino del virus del herpes simple tipo 1. A pesar de las diferencias químicas debido a los diferentes orígenes vegetales de las resinas que utilizaban las abejas para producir el propóleo ( Baccharisdracunculifolia , Baccharis eriodata y Myrceugenia euosma) , los tres extractos de propóleo no solo tuvo efectos directos anti-HSV-1, sino que también estimuló la actividad inmunológica contra la infección intradérmica por HSV-1 en ratones.

Se ha informado de la actividad antiviral del propóleo para virus de ADN y ARN (poliovirus, virus del herpes simple y adenovirus) en un modelo in vitro (células cultivadas). Los mejores resultados fueron obtenidos contra poliovirus y el virus del herpes, con 99,9% de inhibición de este último, en una concentración de propóleo de 30 ug / ml [97]. Los componentes del propóleo crisina y kaempferol causaron una reducción dependiente de la concentración de la replicación intracelular de las cepas del virus del herpes cuando el hospedador, las monocapas de células se infectaron y posteriormente se cultivaron en un medio que contenía fármaco. Quercetina otro componente de propóleo, tuvo el mismo efecto, pero solo en las concentraciones más altas probadas (60ug / mL) contra varias cepas del virus del herpes simple humano, con una replicación y reducción intracelular de aproximadamente 65%, mientras que redujo la infectividad del virus del herpes bovino, humano adenovirus, coronavirus humano y coronavirus bovino alrededor del 50%. La reducción fue del 70% en el caso de rotavirus

8. Propiedades antiinflamatorias e inmunomoduladoras del propóleo

Los casos más críticos de COVID-19, que requieren cuidados intensivos asistidos por ventilador y a menudo resultan en una dependencia prolongada del ventilador y la muerte, son el resultado de una exagerada respuesta inflamatoria a la infección [98]. La infección por SARS-CoV-2 se asocia con un aumento de niveles de quimiocinas y citocinas proinflamatorias activadas que conducen al desarrollo de neumonía atípica, con insuficiencia respiratoria rápida e insuficiencia pulmonar [19].

Se han demostrado fenómenos inmunológicos / inflamatorios (como el síndrome de liberación de citocinas) ver factores importantes de mortalidad en la infección por SARS-CoV-2. Niveles séricos más altos de citocinas inflamatorias, como IL-6, IL-1 y TNF-α, se encuentran en pacientes con COVID- grave.19 en comparación con los de individuos con enfermedad leve [21]. Mecanismos moleculares implicados en este proceso inmunológico son el objetivo de varios medicamentos sintéticos que se están probando en pacientes, incluyendo ciclesonida, hidroxicloroquina, ivermectina y ketorolaco, que son bloqueadores de PAK1[10]. PAK1 (quinasa 1 activada por RAC / CDC42) se sobre expresa en el pulmón en respuesta al SARS-Infección por CoV-2 y es un mediador crítico de la tormenta de citocinas que con frecuencia resulta mortal en pacientes hospitalizados [99]. Afortunadamente, los componentes del propóleo son bloqueadores eficaces de PAK1

Existe evidencia considerable de que el propóleo puede reducir y aliviar los síntomas de enfermedades inflamatorias [22-24] y tiene propiedades inmunomoduladoras [24, 37]. Sin embargo, las propiedades pueden variar según el origen vegetal del propóleo, así como el proceso de extracción / disolvente utilizado y el protocolo inflamatorio (cultivo celular, modelos animales, inducción porlipopolisacáridos) cuando se analizan los extractos de propóleo [50]. Las pruebas con modelos animales han demostrado que el propóleo puede reducir los niveles de IL-6 y TNF-alfa, que son factores proinflamatorios, mediadores clave y aumentan los niveles de la citoquina reguladora IL-10 [24]. Kaempferol, un propóleo componente, reduce IL-6, TNF-alfa y VEGF (factor de crecimiento endotelial vascular) a través de la vía ERK-NFkB-cMyc-p21 [83] (Tabla 1). Las pruebas en cultivos de células de macrófagos también demostraron que el propóleo inhibe la producción de IL-1 beta, un componente importante de la vía inflamatoria del inflamasoma, en enfermedades tales como artritis reumatoide, lupus y otras enfermedades autoinmunes [55]. Aunque los mecanismos de acción no están bien aclarados, estos componentes del propóleo tienen potencial como suplementos complementarios en el tratamiento preventivo de enfermedades inflamatorias crónicas

9. El propóleo tiene potencial como adyuvante de vacunas.

El propóleo se considera un inmunoestimulante seguro y un potente adyuvante de vacunas [101]. El propóleo ha sido ampliamente probado como adyuvante de vacuna , porque induce una respuesta inmune más temprana y proporciona un período de protección más largo [102]. También se incluye como ingrediente adyuvante en medicina china [103]. Los flavonoides de propóleo tienen potencial como adyuvantes, mejorando la IgG, IL-4 yIFN-γ en suero [104]. Fernandes y col. [86] encontró que el propóleo ejercía un efecto adyuvante positivo sobre las vacunas que se desarrollaron contra el coronavirus canino. Analizaron IFN-γ, que es una forma eficaz de medir la respuesta celular inducida por una vacuna. En un modelo de ratón, el propóleo añadido como adyuvante a la vacuna inactivada contra el virus del herpes porcino tipo 1, estimuló el aumento y respuestas humorales, aumentando IFN-γ [105, 106]. El propóleo mejoró la respuesta inmune a vacuna inactivada contra el parvovirus porcino en cobayas [107]. Cuando se agrega a un Trichomonasvacuna de proteína vaginalis , el propóleo aumentó la respuesta de anticuerpos IgG de 4 a 10 veces en ratones en comparación con la proteína sola [108] . El propóleo también fue eficaz como coadyuvante en la inmunización de bovinos con herpes virus bovino [105]. Mejoró las respuestas humorales y celulares en ratones inoculados con vacunas de virus inactivados [109]. El propóleo como adyuvante proporcionó una inmunidad similar respuesta (aumento de los niveles de IFN-γ), al adyuvante de Alum y Freund en ratones vacunados con un candidato a vacuna politopo contra el VIH-1, con menor riesgo de efectos secundarios indeseables 

10. Comorbilidades y evidencia de cómo el propóleo puede ayudar a reducir su impacto en COVID-19 pacientes

10.1 Cáncer

El cáncer se considera un factor de comorbilidad relevante para COVID-19. Los pacientes con cáncer tienen 3-4 veces mayor riesgo de progresar a la enfermedad COVID-19 grave que los pacientes sin comorbilidades. Además, el entorno hospitalario durante la pandemia de coronavirus puede interferir como retrasar el tratamiento que deben recibir los pacientes con cáncer. Los pacientes con síntomas pueden elegir no arriesgarse a una visita a una clínica u hospital para determinar si tienen cáncer [111]. Terapias alternativas podrían ayudar a retrasar el cáncer o reducir el impacto del cáncer y el tratamiento del cáncer en pacientes COVID-19. El propóleo tiene potencial como terapia complementaria para el cáncer. Ha demostrado eficacia contra varios tipos, incluyendo vejiga, sangre, cerebro, mama, colon, cabeza y cuello, riñón, hígado, páncreas, cánceres de próstata y piel [112]. El propóleo podría ayudar a prevenir la progresión del cáncer; en varias partes del mundo se considera una terapia alternativa para el tratamiento del cáncer [113]. Extractos de propóleo se han descubierto que inhiben el crecimiento de células tumorales tanto in vitro como in vivo , incluida la inhibición de angiogénesis, que demuestra el potencial para el desarrollo de nuevos fármacos contra el cáncer

Se ha demostrado que varios componentes del propóleo inhiben el crecimiento de las células cancerosas, incluido el ácido [66], CAPE [117-119], quercetina [120] y crisina [121]. Propóleo y sus componentes normalmente tienen poco impacto en las células normales, mostrando citotoxicidad diferencial en el cáncer de hígado, líneas celulares de melanoma y carcinoma de células de mama [122, 123]. El propóleo mejora la actividad del tumor ligando inductor de apoptosis relacionado con el factor de necrosis (TRAIL) en células cancerosas [124].

10.2 Hipertensión y enfermedad cardiovascular

La hipertensión y la enfermedad cardiovascular se consideran comorbilidades relevantes para COVID-19 [125-127]. El propóleo ha demostrado efectos antihipertensivos en modelos de rata [33, 34,128, 129]. En Camerún, se utiliza en la medicina popular para tratar diversas dolencias, incluida la alta presión arterial [130]. El propóleo se ha utilizado ampliamente como suplemento dietético por sus beneficios para la salud, incluidos los efectos protectores cardiovasculares [131, 132]. En un ensayo en humanos, el consumo de propóleo consigue mejores parámetros sanguíneos críticos, incluidos los niveles de HDL, GSH y TBARS, lo que demuestra que podría contribuir a reducir el riesgo de enfermedad cardiovascular

10.3 Obesidad

La obesidad es una comorbilidad importante y un predictor de aumento de la mortalidad en pacientes con COVD-19.Tanto la obesidad como el SARS-CoV-2 inducen un proceso inflamatorio que agrava el SARS-CoV-2infección en los obesos [133]. El propóleo redujo la inflamación y previno la hiperlipidemia y los síndromes metabólicos en dietas altamente calóricas indujeron obesidad en ratones. Aumento de peso corporal, tejido visceral adiposo, los triglicéridos hepáticos y séricos, el colesterol y los ácidos grasos no esterificados fueron todos reducido en los ratones alimentados con propóleo [78, 134]. El éster fenetílico del ácido cafeico, un componente de propóleo, es un agente natural contra la obesidad [135].

10.4 Tromboembolia, trombosis y microtrombosis

Microtrombosis, coagulación intravascular diseminada y consecuente fallo multiorgánico es común en pacientes con COVID19 gravemente afectados, con altas tasas de mortalidad asociadas[136-139]. A veces se prescriben anticoagulantes a estos pacientes porque pueden reducir mortalidad (Tang et al. 2020). Un nivel elevado de inhibidor del activador del plasminógeno-1 (PAI-1) es un biomarcador y factor de riesgo de trombosis y aterosclerosis [140, 141]. Varios tipos de evidencias, demuestran que el propóleo puede reducir la agregación plaquetaria y otros parámetros relacionados con la trombosis

El propóleo disminuyó las tendencias trombóticas en ratones al suprimir la inducida por aumento de lipopolisacáridos en los niveles de PAI-1 [142, 143]. El propóleo redujo el factor de crecimiento derivado de plaquetas y moléculas de adhesión de células endoteliales plaquetarias en ratones knockout para lipoproteínas de baja densidad [144]. La agregación plaquetaria se redujo con propóleos en pruebas en sangre humana in vitro [145] y en otras pruebas in vitro [146]. Éster fenetílico del ácido cafeico (CAPE), un propóleo bioactivo bien estudiado, inhibe la activación plaquetaria inducida por colágeno [147].

10.5 Vejez

Los ancianos se ven afectados más a menudo por la inflamación crónica, caracterizada por un sistémicamente aumento de los niveles de citocinas proinflamatorias, que pueden contribuir al desarrollo de una tormenta de citocinas, una de las principales causas de mortalidad por COVID-19 [148]. El propóleo tiene propiedades antioxidantes, que podría ayudar a retrasar o reducir los procesos de envejecimiento [149]. CAPE, un componente de propóleo, aumentó la vida útil de Caenorhabditis elegans , un organismo modelo común para los estudios de envejecimiento [150]. El consumo de propóleo, protege contra el deterioro cognitivo en sujetos de edad avanzada (seres humanos) expuestos a altas altitudes [151]. Los niveles séricos de TGF-β1 e IL-10 fueron significativamente más altos en los pacientes tratados con propóleo, sujetos de edad avanzada, ayudando a reducir la inflamación, que podría ser el mecanismo de protección contra el deterioro cognitivo. Actividad de la superóxido dismutasa (SOD), un antioxidante clave en los hombres tratados con el propóleo aumentó, mientras que el malondialdehído, un marcador de estrés oxidativo, disminuyó [152]. Se detectaron las mismas tendencias en un modelo de rata diabética [153]. El propóleo tiene el potencial de reducir el daño neurodegenerativo a través de la actividad antioxidante, que ayuda a proteger contra los efectos de deterioro cognitivos en la enfermedad de Alzheimer y envejecimiento [154, 155]. En un modelo de ratón de enfermedad de Alzheimer, el coniferaldehído, un ingrediente activo del propóleo, tenía efectos neuroprotectores. Redujo depósitos de β-amiloide cerebral y cambios patológicos en el cerebro, lo que ayuda a preservar el aprendizaje y capacidad de memoria [156]. El sistema de angiotensina, que es clave para la invasión del huésped por SARS-CoV-2 células, se asocia con la senescencia. Una de las razones por las que el SARS-CoV-2 causa significativamente mayor mortalidad en pacientes mayores puede deberse a que tienen un mayor número de células pulmonares senescentes, que son un objetivo vulnerable para la infección viral y pueden ayudar a promover la replicación viral. Eso podría hacer que los fármacos senolíticos sean útiles para ayudar a los ancianos a sobrevivir al COVID-19. Quercetina, un componente del propóleo, que se ha propuesto como terapéutico para el tratamiento de COVID-19, tiene serolíticos activos [157

10.6 Diabetes

Las comorbilidades comunes con altas tasas de muerte en pacientes críticos con COVID19 incluyendo diabetes [30]. Dada la relación entre diabetes e inflamación, y que los flavonoides, los principales componentes bioactivos del propóleo, protegen contra los radicales libres y otros compuestos pro-oxidativos, es plausible que el consumo de propóleo pueda reducir el riesgo de diabetes [158]. Propóleo brasileño se ha vuelto popular como suplemento dietético saludable en varias partes del mundo porque puede ayudar a prevenir la inflamación y la diabetes [159]. Se descubrió que el propóleo reduce la glucosa en sangre, los lípidos en sangre y radicales libres en ratas diabéticas [31, 160]. También redujo la glucemia [32, 161] y la resistencia a la insulina [162-164] en ratas diabéticas. También se evitó la nefropatía diabética experimental [165]. Los síntomas de la diabetes se redujeron en un modelo de ratón diabético [166], aparentemente al atenuar la activación inmune en tejidos adiposos. Los ensayos clínicos con pacientes diabéticos demostraron que el consumo de propóleo mejoró parámetros antioxidantes [167], control glucémico [168, 169] y perfil lipídico y función renal[170]. El propóleo es también un agente antimicrobiano con propiedades curativas en heridas [171, 172], demostrando ser especialmente útil para los pacientes diabéticos [173, 174], que tienden a desarrollar dificultades para curar heridas. El éster fenetílico del ácido cafeico (CAPE) se considera un agente contra la obesidad con beneficiosos efectos sobre la inflamación y la diabetes [175]. CAPE redujo la resistencia a la insulina en ratones diabéticos y en cultivo de células hepáticas [176]. La crisina, otro componente del propóleo, también tiene propiedades antidiabéticas [177].

10.7 Enfermedades renales

COVID-19 es una amenaza importante para los pacientes con comorbilidades como la renal , o deterioro hepático [178]. El riñón es un objetivo habitual del SARS-CoV-2 [179]. Los pacientes con COVID-19 son con mayor riesgo de insuficiencia renal [79] y, en consecuencia, muchos pacientes con COVID-19 presentan disfunción renal [180]. El aumento de la mortalidad es común en pacientes con COVID-19 con enfermedad renal crónica y en pacientes sometidos a hemodiálisis [181]. El propóleo se ha mostrado protector contra las enfermedades renales. La nefropatía se previno mediante el tratamiento con propóleo en animales modelos [165, 182, 183]. El propóleo rojo brasileño atenuó la hipertensión y el daño renal en una rata modelo de ablación renal [184]. La actividad antidiabética del propóleo en un modelo de rata redujo el daño hepático 160]. En un ensayo clínico pionero, el propóleo redujo la proteinuria en pacientes con insuficiencia renal crónica [51].

10.8 Infección bacteriana

La infección bacteriana es una complicación común en COVID-19 [79]. El propóleo tiene una larga historia de uso por sus propiedades antibacterianas y podría ayudar a tratar infecciones bacterianas en pacientes con COVID-19. Las propiedades curativas de los propóleos se mencionan en todo el Antiguo Testamento, y el propóleo fue prescrito por Hipócrates en la Antigua Grecia para el tratamiento de llagas y úlceras [185]. Propóleo ha sido popular durante siglos en Rusia y otros países de Europa del Este por sus propiedades antibacterianas [186]. El valor farmacológico del propóleo proviene de una mezcla natural de sustancias antibacterianas, en lugar de sólo una o unas pocas sustancias como en la mayoría de los medicamentos [187].Componentes de propóleo galangina, pinocembrina, rutina, quercetina y naringenina, así como CAPE aumentan la permeabilidad de la membrana bacteriana, lo que podría explicar sus propiedades antimicrobianas[188]. De Campos y col. [189] mostró que el principal mecanismo de acción del propóleo es la ruptura y lisis de células bacterianas. El propóleo ha demostrado actividad antibacteriana contra Staphylococcusaureus , Staphylococcus epidermidis y E. coli [190], incluidos los resistentes a meticilina y cepas de Staphylococcus aureus sensibles a la meticilina [191]. Añadiendo extracto de propóleo a los antibióticos, ampicilina, gentamicina y estreptomicina, vancomicina y oxacilina aumentaron su actividad antibacteriana contra Staphylococcus aureus [192, 193]. El extracto también redujo las adhesión a las células y consiguiente formación de biopelículas por esta bacteria [193]. Propóleos (a veces conocido como pegamento de abeja) tiene actividad antibacteriana contra el bacilo tuberculoso humano, pero a menudo sólo tiene una limitada actividad contra bacilos gramnegativos. Estas propiedades antimicrobianas parecen deberse a su alto contenido de flavonoides [186]. El propóleo puede ayudar a evitar la caries bacteriana [194]. Propóleos y algunos de sus componentes inhiben la motilidad bacteriana [195]. Álamo negro, Populus nigra , la resina del árbol es la principal fuente del propóleo utilizado con fines medicinales en Europa; contiene fenoles y flavonoides que tienen propiedades antimicrobianas bien conocidas [196]. El propóleo puede ser bacteriostático y/o bactericida, dependiendo de la concentración [197]. Un extracto etanólico de propóleo inhibe el crecimiento microbiano y formación de biopelículas por Pseudomonas aeruginosa [198]. Las propiedades antibacterianas del propóleo lo convierten en un ingrediente útil en una biopelícula de cicatrización de heridas [199] 

11. Limitaciones: falta de estandarización

El hombre ha utilizado el propóleo como medicina herbal durante miles de años. Varias utilidades se han descrito para el propóleo, que incluyen, entre otras, antivirales, antibacterianas, propiedades antifúngicas, antiinflamatorias, inmunorreguladoras, antioxidantes y de cicatrización de heridas [200,201]. Sin embargo, la fuente geográfica de la planta, las especies de abejas, la estacionalidad y las diferencias climáticas pueden afectar drásticamente la composición química [48, 202]. Estos detalles, junto con variaciones en el proceso de procesamiento y extracción por solventes (que pueden extraer selectivamente algunos compuestos según su polaridad) [203], puede influir en sus propiedades biológicas. Esto puede afectar y limitarla repetibilidad de las pruebas y confunden la compilación de resultados utilizados para determinar dosis para ensayos clínicos en humanos, lo que en última instancia causa inseguridad para los prescriptores. Se ha realizado un trabajo considerable para comprender los mecanismos implicados en las propiedades del propóleo [54, 189, 204, 205]. Además, se han realizado esfuerzos para mejorar la tecnología y procesos analíticos para determinar los procedimientos de extracción adecuados que preserven sus compuestos bioactivos y proporcionen constantes mejoras en propiedades farmacológicas para cada tratamiento médico. [50, 200, 201, 203, 206-208]. Sin embargo, aunque el propóleo es un producto que se puede ofrecer al mercado en varias presentaciones y con diferentes clasificaciones según el tipo de producto, posiblemente como complemento para la salud, complemento alimenticio, producto cosmético y / o de higiene, diversos efectos beneficiosos que aparecen en las investigaciones publicadas no fueron aceptados por los europeos.

Comisiónes con «afirmaciones» aceptables, basadas en el argumento de que existen variaciones cuantitativas en los flavonoides bioactivos, que dependen de la materia prima proporcionado por lo apicultores. Esos factores y la falta de extracción y preparación de métodos estandarizados, son razones que no permiten este tipo de homologación [209], lo que justifica la propuesta de estandarización por Chan [38]. Aunque en el campo de los productos apícolas la “estandarización” no es todavía un procedimiento normal, esto en realidad ya existe en la industria fito farmacéutica. Cuando se trabaja con productos a base de hierbas, es normal encontrar diferencias en la materia prima recibida, ya que las plantas sufren una fuerte influencia del medio ambiente, incluida la estacionalidad, el tratamiento del suelo, otras especies de plantas cercanas y diversas otras condiciones, lo que da como resultado lotes de materiales vegetales que a menudo son químicamente diferentes, cualitativa y/o cuantitativamente. No es posible tener lotes idénticos cuando se trabaja con este tipo de material; sin embargo, se necesita una estandarización mínima para validar la seguridad y estudios de eficacia y garantía de características útiles cuando se ofrece un producto al mercado [210].

11.1 Un producto de propóleo estandarizado

En Brasil, ya se han descrito 12 tipos principales de propóleos [201]. Debido a este gran variabilidad y las limitaciones que estas diferencias causan en la investigación, desarrollo y campos industriales, Berretta et al. [54] desarrolló un extracto de propóleo estandarizado, llamado EPP-AF®(Carta de Patente No. 0405483-0, aprobada por la Revista de Propiedad Industrial el 23 de julio de 2019), que posee reproducibilidad lote a lote para un grupo de compuestos fenólicos y flavonoides, además de una huella dactilar de HPLC característica y efectos biológicos consistentes (antimicrobianoactividad) [54]. Se han realizado varios estudios con este extracto, incluidos los desarrollos analíticos y validación [54, 212, 213], efectos biológicos como antimicrobianos, antifúngicos y propiedades de cicatrización de heridas [54, 205, 214-217], y antiinflamatorias y actividades inmunorreguladoras[22, 24].

12.2 Estudios de seguridad y eficacia

12.2.1 Estudios no clínicos

Además de la larga historia del uso tradicional del propóleo para el tratamiento de enfermedades, diversos estudios en animales han demostrado la seguridad del propóleo [218-220]. Los estudios de seguridad para EPP-AF ® se han realizado utilizando una prueba de Ames in vitro , que demuestra la ausencia de anomalías en las cepas de bacterias evaluadas (datos no publicados) y ausencia de anomalías en una prueba de micronúcleos( in vitro ) [221]. Tavares y col. [222] también estudió el propóleo utilizando una herramienta de micronúcleos, con el agente de mutagenicidad doxorrubicina como control positivo. Descubrieron que el propóleo se comportaba como un compuesto «Janus»; era genotóxico en concentraciones más altas y quimiopreventivo en concentraciones más bajas. Esto demuestra la importancia de la dosis y el modelo adecuados para las pruebas, que son necesarias para extrapolar correctamente a los ensayos clínicos. Además, toxicidad animal aguda y sub crónica se realizaron pruebas; incluso a niveles de tratamiento muy altos, el propóleo EPP-AF ® no alcanzó un LD 50dosis (máxima probada 3000 mg / kg) [223]. Los datos de seguridad de las pruebas con ratas Wistar (1000 mg / kg) y conejos (300 mg / kg), y el factor de conversión propuesto por el Departamento de Alimentos y Medicamentos de EE. UU. Se utilizó la agencia para proponer las dosis para los ensayos en humanos [50]

12.2.2 Ensayos clínicos

Se realizó un estudio de seguridad clínica en la Facultad de Medicina de Ribeirão Preto de la Universidad de São Paulo (FMRP / USP) con voluntarios sanos para evaluar la seguridad de ingerir 375 mg / día de extracto de propóleo estandarizado (EPP-AF®), durante cinco días. No e observaron eventos adversos. El estudio señaló la ausencia de toxicidad aguda después del uso oral de extracto de propóleo estandarizado (EPP-AF®) a una dosis de 375 mg al día durante cinco días. La significativa variación positiva observada en el parámetro colesterol HDL necesita más estudios con un mayor número de pacientes para confirmar este efecto beneficioso sobre el sistema cardiovascular (no publicado datos).Además, y más importante en este caso, se realizó un estudio para evaluar la interacción farmacológica, realizado mediante un enfoque de cóctel para analizar las principales enzimas metabolizadoras hepáticas(enzimas del citocromo P450 – CYP) y la enzima transportadora Pgp. Los resultados mostraron que este extracto de propóleo estandarizado es seguro y sin riesgo de interacción farmacológica, según los criterios establecidos por la OMS [53]. El propóleo probado en el estudio de interacción se proporcionó en tabletas; en consecuencia, estos resultados no pueden extrapolarse necesariamente a un extracto de alcohol de propóleo

Usando una preparación de propóleo, un ensayo clínico que fue aleatorizado, doble ciego y controlado con placebo se realizó con 430 niños (1-5 años) en Israel con un elixir de placeboy Chizukit (un medicamento estándar de venta libre que contiene extracto de equinácea 50 mg / ml ( equináceapurpurea y E. angustifolia ), 50 mg / ml de extracto de propóleo y 10 mg / ml de vitamina C, parala infección del tracto respiratorio dio buenos resultados [224]. Se realizó otro estudio clínico para el tratamiento del asma en adultos [204]. El estudio, que utilizó un extracto de agua de propóleo, demostró una reducción en citocinas proinflamatorias clave, incluido el factor de necrosis tumoral (TNF-a), ICAM-1, IL-6, IL-8y un aumento de 3 veces en la citoquina «protectora» IL-10; los niveles de prostaglandinas E2, F2a yel leucotrieno D4 se redujo significativamente [204].Un estudio clínico aleatorizado, doble ciego controlado con placebo de 32 pacientes con enfermedad crónica, enfermedad renal, seguridad demostrada del extracto de propóleo estandarizado (EPP-AF ® ) en una dosis de 500 mg / día después de la administración durante 12 meses, con una reducción significativa de proteinuria y MCP1 urinaria en el grupo de propóleo en comparación con el placebo [51], sin efectos secundarios

Otro estudio clínico realizado con el Extracto de Propóleo Estandarizado (EPP-AF ® ) en voluntarios sanos con el objetivo de evaluar la actividad antioxidante. Hubo una reducción en el daño celular, inducido por estrés oxidativo en voluntarios sanos, debido a un aumento del antioxidante enzimático, afectando especialmente a la superóxido dismutasa (SOD), y disminuyendo la peroxidación lipídica y oxidación del ADN (8-OHDG) (artículo enviado). Estos datos indican el importante efecto protector que el propóleo tiene en las células, tejidos y en el cuerpo humano, reduciendo los efectos del envejecimiento, enfermedades degenerativas y varias otras condiciones que involucran estos procesos de oxidación. Otro ensayo clínico relevante fue realizado por Soroy et al. [225] sobre el dengue en pacientes hemorrágicos con fiebre. Su ensayo doble ciego, aleatorizado y controlado con placebo evaluó el propóleo Propoelix TM (dos cápsulas de 200 mg, tres veces al día), que demuestra una mejora en recuentos de plaquetas y una disminución de TNF-alfa, lo que promueve una reducción en la duración del tiempo de hospitalización de los pacientes. La actual pandemia de COVID-19 ha suscitado un gran interés por el propóleo como una opción de tratamiento terapéutico. Como consecuencia, un ensayo clínico de extracto de propóleo verde brasileño (EPP-AF) para el tratamiento de los pacientes con COVID-19 se inició recientemente en Brasil(https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT04480593).

12. 3 dosis

Se han realizado ensayos clínicos con propóleos en varias regiones del mundo, la mayoría de ellos con la limitación de una falta de estandarización. Berretta y col. [50, 51, 53] evaluaron muchos de ellos; la dosis más común utilizada fue de 500 mg / día para adultos. Considerando el caso de EPP-AF ® , los datos clínicos hasta ahora son compatibles con dosis de 375 – 500 mg de própolis / día; sin embargo, los ensayos clínicos indican que pueden tolerarse dosis mucho más altas y pueden ser útiles [211]. las dosis de 500 mg / día equivaldría a 30 gotas de extracto de propóleo (con 11% p / v de extracto seco materia), de 3 a 4 veces al día, diluido en aproximadamente 100 ml de agua, o de 3 a 4 unidades / día de cápsulas o tabletas con la cantidad equivalente de extracto. Para fines preventivos, 30 gotas / día o una cápsula, generalmente se toman. Sin embargo, considerando la dosis utilizada de forma segura por Soroy et al. [225] de1200 mg / día, en casos más graves de COVID-19, podrían ser útiles dosis superiores a 500 mg / día.

13. Suplementos, productos alimenticios y de higiene elaborados con propóleo

Los extractos y aerosoles de propóleo, a menudo combinados con extractos de hierbas medicinales y miel, son ahora se encuentran en casi todas las farmacias de Brasil, lo que demuestra su seguridad, popularidad y utilidad en este país, donde cientos de empresas producen actualmente estos “medicamentos naturales”. Para en cada categoría regulatoria y país, las reglas técnicas que deben seguirse para los productos de propóleo varían. Algunos países como Brasil, Canadá, Estados Unidos de América, China, Corea del Sur, Japón, Australia y la Comunidad Europea ya cuentan con una reglamentación para el propóleo [50]; como consecuencia, el propóleo puede ser encontrado fácilmente por los consumidores a bajo costo y potencialmente puede ser útil para la prevención y/o con fines curativos en las primeras etapas de la enfermedad.

14. ¿Por qué considerar el uso de nutracéuticos u otras alternativas naturales en lugar de depender deproductos farmacéuticos modernos?

El propóleo se usa ampliamente en alimentos y bebidas debido a sus beneficios para los seres humanos. Contiene cientos de compuestos naturales, incluidos aldehídos, cumarinas, polifenoles, esteroides y compuestos inorgánicos, con un amplio espectro de efectos biológicos y propiedades farmacológicas, incluyendo antimicrobianas, antioxidantes, antiinflamatorias, inmuno moduladoras, acciones antitumorales, anticancerígenas, antiulcerosas, hepato protectoras, cardio protectoras y neuro protectoras[226]. La industria de la salud siempre ha utilizado productos naturales, incluido el propóleo, como alternativa

La compleja mezcla de componentes del propóleo puede proporcionar mayores beneficios para la salud.de lo que sería evidente al analizar los efectos individuales de los componentes, aparentemente debido a efectos sinérgicos [97].La medicina moderna se basa en medicamentos potentes que tienen un impacto fuerte y específico sobre la enfermedad, organos y en el cuerpo. Esta estrategia y las medidas sanitarias adecuadas han demostrado ser altamente efectivas, lo que resulta en un aumento casi constante en la esperanza de vida humana, que se ha más que duplicado desde 1900 hasta más de 70 años [227]. Sin embargo, el sistema establecido para aprobar productos farmacéuticos también tiene algunas desventajas, incluido el largo tiempo de espera y la considerable financiación necesaria para descubrir nuevas opciones, pruébelas en cuanto a seguridad y eficacia, y después de 5 a 10 años, obtenga la aprobación para su uso. Debido a los altos costos involucrados y la posibilidad de que este proceso extendido no dar como resultado un producto que compensará la inversión requerida, los materiales potencialmente útiles pueden que nunca estarán disponibles. Otro problema es que la medicina moderna puede ser bastante cara, con costos en constante aumento para individuos y países. En consecuencia, una atención médica adecuada pueden no estará disponible para todos los que lo necesiten. Los efectos secundarios de muchos de estos potentes medicamentos son también una preocupación. Los médicos y los pacientes a menudo deben sopesar el riesgo de efectos secundarios de los medicamentos con las consecuencias de la enfermedad. Además, para algunas enfermedades no se dispone de un fármaco eficaz y no hay atención al paciente se centra en aliviar los síntomas y las consecuencias de la infección. Entre las alternativas a las drogas modernas, ha existido durante mucho tiempo un uso tradicional de la salud cómo producto natural. Sin embargo, estos productos normalmente no pueden registrarse como medicamentos; la considerable inversión necesaria para calificarlos como tales a menudo no sería compensada porque es difícil de obtener una patente y la gente podría comprarlos o recolectarlos fácilmente. Curiosamente, uno delas estrategias para desarrollar medicamentos modernos es diseccionar cuidadosamente los componentes de los productos, determinar cuáles tienen una actividad deseable, patentarlos y sintetizarlos y luego ira través del costoso proceso de obtener su aprobación, aunque con alguna posibilidad de que tales productos podrían dar un retorno de la inversión debido a las patentes. Un ejemplo es el propóleo brasileño verde, para el cual existe evidencia considerable de propiedades anticancerígenas [228, 229]. Este propóleo no está patentado, pero algunos si sus componentes fueron aislados y sintetizados, y ahora están los medicamentos patentados para el tratamiento del cáncer [230]. Brasil sigue produciendo y exportando grandes cantidades de propóleo verde, especialmente a los países asiáticos, pero varios componentes patentados son propiedad de empresas en otros países.

En algunas partes del mundo, el equivalente de la Administración de Drogas y Alimentos de los EE. UU. (FDA),clasifica oficialmente ciertos productos naturales como “Alimentos funcionales” o alguna otra categoría similar. Como tales, pueden ser producidos, comercializados y utilizados por personas que creen que serán buenos para su salud. Para ser clasificados como alimentos funcionales, estas agencias requieren prueba de que son seguros y que han demostrado beneficios para la salud [71, 231]. Esta opción proporciona alternativas que son normalmente económicos y no requieren prescripción médica. Específicamente, se ha sugerido propóleo cómo tratamiento profiláctico para grupos de alto riesgo en la actual pandemia de COVID-19 [232]. Es necesaria alguna inversión para ayudar a calificar y registrar los medicamentos naturales, que pueden ser proporcionado por empresas o por programas gubernamentales que reconozcan la necesidad de este tipo de inversión, o ambas. En Brasil, la agencia de investigación del estado de Sao Paulo (FAPESP), tiene un programa llamado PIPE que ayuda a las pequeñas empresas a financiar este tipo de investigación para productos que reconocen que normalmente no se desarrollarían sin este tipo de apoyo, incluyendo alternativas naturales de control de plagas para la agricultura y formulaciones de “medicina natural”. Varios proyectos de investigación sobre productos de propóleos han sido financiados por este programa FAPESP PIPE , incluyendo cicatrización de heridas y productos antifúngicos [54, 205, 214-216], y el desarrollo de una formulación estandarizada de propóleo [54]; Se realizaron pruebas de este producto para garantizar su seguridad y eficacia en pacientes con enfermedad renal crónica y diabetes [51]; ambas enfermedades son objeto de proyectos apoyados por FINEP (Agencia Brasileña de Financiamiento de Estudios y Proyectos). Mientras que los medicamentos modernos normalmente tienen solo uno o solo unos pocos componentes activos, los productos pueden tener muchos. El propóleo, por ejemplo, tiene cientos de componentes [226], muchos de los cuales tienen propiedades que tienen el potencial de ayudar a tratar varios tipos de enfermedades o tienen varios modos de acción contra una enfermedad específica y sus consecuencias [233-235]. Otra consideración es que un fuerte efecto específico, como el de un anticoagulante utilizado en un esfuerzo por prevenir la micro trombosis que se han convertido en una consecuencia grave del COVID19 avanzado [236], requiriendo dosis específicas para evitar un sangrado excesivo y otros efectos secundarios peligrosos [237], y tales medicamentos no son una opción segura para los pacientes que tienen algunos tipos de enfermedades de la sangre o varios problemas cardíacos y trastornos de los vasos. Un anticoagulante natural podría brindar cierta protección y en un nivel suficiente para reducir el riesgo de trombosis sin efectos secundarios fuertes. El propóleo ha demostrado tener propiedades anticoagulantes [147].

15. Conclusiones

Considerando la gran cantidad de muertes y otros tipos de daños que el COVID-19La pandemia está causando, existe una necesidad urgente de encontrar terapias que puedan ayudar a evitar o reducir el SARS, infección por CoV-2 y sus consecuencias. El propóleo ha demostrado ser antiinflamatorio y efectos inmunorreguladores, incluida la inhibición de PAK-1. Además, el apego a ACE2, un objetivo importante del virus SARS-CoV-2 para la invasión de la célula huésped, es inhibido por el propóleo. Componentes de propóleo, incluyendo CAPE, rutina, quercetina, kaempferol y miricetina han demostrado in silico una fuerte interacción con ACE2. Kaempferol redujo la expresión de TMPRSS2. Además de estas actividades, el propóleo no interactúa con las principales enzimas hepáticas ni con otras enzimas clave; según los criterios adoptados por la Organización Mundial de la Salud, por lo que se puede utilizar propóleo concurrentemente con los principales fármacos sin riesgo de potenciación o inactivación. Para determinar si el propóleo afecta específicamente al SARS-CoV-2, será necesario realizar más investigaciones. Pero dado que el propóleo es un producto sin riesgo, excepto para quienes puedan desarrollar una alergia al mismo, las actividades biológicas conocidas de este producto natural apícola nos llevan a sugerir su uso para reducir el riesgo e impacto de la infección y como complemento del tratamiento.

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